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ATCC細胞的培養液配制簡介

發布時間: 2021-07-16  點擊次數: 314次
   ATCC細胞的細胞培養液的主要成分是氨基酸、葡萄糖、無機鹽、維生素和微量元素等。為了維持穩定的pH,培養液中一般有一個pH緩沖系統,同時常加入少量的酚紅作為pH指示劑。另外培養液中一般需要加入一定量的血清。
  ATCC細胞培養液中的氨基酸除了13種細胞生長所必須的氨基酸外,往往加入一些非必需的氨基酸以促進細胞的生長。在必需的氨基酸中,L-谷氨酰胺在溶液中不穩定(在4℃培養溶液中半衰期為3個星期,37℃中為1個星期),需要在使用時加入。所有培養器皿均需清水沖洗2-3d,達兩次ddH2O,每遍洗刷3-4次,加塞包裝,置于烤箱中干燥消毒,于培養前1天進行。
  ATCC細胞培養液的配制明細:
  1.解剖液:以無機鹽(去除Ca2+,Mg2+)加葡萄糖配制成PBS緩沖液,保持一定的滲透壓和pH值。
  2.基礎培養基(MEM):主要為多種氨基酸,加入葡萄糖,雙蒸餾水溶解。
  3.接種培養液:用于胰酶消化后的細胞分散,做成細胞懸液,其成分為MEM含1%谷氨酰胺,另加入10%馬血清,當天配制。
  4.維持培養液:接種后24h,全部換成此液,后每2周換一次,每次換1/2。其成分為MEM中含5%馬血清,1%谷氨酰胺,及適量的支持性營養物質。

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