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Gibco血清的培養基配制及前處理說明

發布時間: 2021-09-11  點擊次數: 251次
   培養某一類型細胞沒有固定的培養條件,Gibco血清培養時該如何選對培養基呢?
  一、合成培養基的配制
  1.根據細胞目錄中的說明,按下表選擇合適品牌及貨號的培養基干粉,用適量超純水充分溶解。
  2.按要求添加碳酸氫鈉、谷氨酸鈉、HEPES等,充分攪拌使之溶解。
  3.調pH至7.2左右。
  4.加水至最終體積。
  5.在超凈臺中對溶液進行濾過除菌,分裝入250 mL或500 mL玻璃瓶中,用翻帽塞塞緊瓶口。
  6.瓶口封好,4℃冰箱貯存。
  二、生長培養基的配制
  除無血清培養之外,各種合成培養基在使用前需加入一定量的血清和抗菌素。
  培養基分裝成小瓶(100-200 mL)以便使用,翻帽塞塞緊瓶口。
  按如下比例配制:基本培養基占80%-90%,血清占10%-20%。按1%體積分數加入雙抗貯存液(青霉素+鏈霉素),使青霉素和鏈霉素的終濃度分別為100 U/mL和100μ/mL。
  三、Gibco血清的處理
  市場上出售的血清一般做了滅菌處理,但在使用前還應做熱滅活處理,即通過加熱的方法破壞補體(近來也有觀點認為熱滅活處理是不必要的)。
  1.將血清加熱至56℃并保持30 min,其間要不時輕輕晃動,使受熱均勻,防止沉淀析出。
  2.處理后的血清貯存于4℃。
  3.血清在使用前最好進行篩選以掌握血清的質量。

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